V prejšnjem projektu testiranja lokalnih obratov za predelavo hrane za komarje na Tajskem je bilo ugotovljeno, da imajo eterična olja (EO) Cyperus rotundus, galangala in cimeta dobro delovanje proti komarjem proti Aedes aegypti.V poskusu zmanjšanja uporabe tradicionalnihinsekticidiin izboljšati nadzor nad odpornimi populacijami komarjev, je bila ta študija namenjena odkrivanju potencialnega sinergizma med adulticidnimi učinki etilen oksida in toksičnostjo permetrina za komarje Aedes.aegypti, vključno s sevi, odpornimi proti piretroidom, in občutljivimi sevi.
Za oceno kemične sestave in uničevalne aktivnosti EO, ekstrahiranega iz korenike C. rotundus in A. galanga ter lubja C. verum proti občutljivemu sevu Muang Chiang Mai (MCM-S) in odpornemu sevu Pang Mai Dang (PMD-R) ).) Odrasel aktivni Ae.Aedes aegypti.Na teh komarjih Aedes je bil opravljen tudi biološki test mešanice EO-permetrin za odrasle, da bi razumeli njegovo sinergistično delovanje.sevi aegypti.
Kemijska karakterizacija z analitično metodo GC-MS je pokazala, da je bilo identificiranih 48 spojin iz EO C. rotundus, A. galanga in C. verum, ki predstavljajo 80,22 %, 86,75 % oziroma 97,24 % vseh komponent.Ciperen (14,04 %), β-bisabolen (18,27 %) in cinamaldehid (64,66 %) so glavne sestavine olja ciperusa, galangalnega olja in balzamičnega olja.Pri bioloških testih ubijanja odraslih so bili C. rotundus, A. galanga in C. verum EV učinkoviti pri ubijanju Ae.aegypti, vrednosti LD50 MCM-S in PMD-R so bile 10,05 in 9,57 μg/mg samice, 7,97 in 7,94 μg/mg samice in 3,30 oziroma 3,22 μg/mg samice.Učinkovitost MCM-S in PMD-R Ae pri ubijanju odraslih.aegypti v teh EO je bil blizu piperonil butoksidu (vrednosti PBO, LD50 = 6,30 oziroma 4,79 μg/mg ženske), vendar ne tako izrazito kot permetrin (vrednosti LD50 = 0,44 oziroma 3,70 ng/mg ženske).Vendar pa so kombinirani biološki testi odkrili sinergijo med EO in permetrinom.Pomemben sinergizem s permetrinom proti dvema vrstama komarjev Aedes.Aedes aegypti je bil opažen v EM C. rotundus in A. galanga.Dodatek olja C. rotundus in A. galanga je znatno zmanjšal vrednosti LD50 permetrina na MCM-S z 0,44 na 0,07 ng/mg oziroma 0,11 ng/mg pri samicah z vrednostmi sinergijskega razmerja (SR). 6,28 oziroma 4,00.Poleg tega sta EO C. rotundus in A. galanga znatno zmanjšala vrednosti LD50 permetrina na PMD-R s 3,70 na 0,42 ng/mg oziroma 0,003 ng/mg pri samicah, z vrednostmi SR 8,81 oz. 1233,33 oz..
Sinergistični učinek kombinacije EO-permetrina za povečanje toksičnosti pri odraslih proti dvema vrstama komarjev Aedes.Aedes aegypti dokazuje obetavno vlogo etilen oksida kot sinergista pri povečanju učinkovitosti proti komarjem, zlasti tam, kjer so tradicionalne spojine neučinkovite ali neprimerne.
Komar Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) je glavni prenašalec mrzlice denga in drugih nalezljivih virusnih bolezni, kot so rumena mrzlica, čikungunja in virus Zika, ki predstavlja veliko in trajno nevarnost za ljudi [1, 2]..Virus dengue je najresnejša patogena hemoragična mrzlica, ki prizadene ljudi, z ocenjenimi 5–100 milijoni primerov letno in ogroženih več kot 2,5 milijarde ljudi po vsem svetu [3].Izbruhi te nalezljive bolezni predstavljajo veliko breme za prebivalstvo, zdravstvene sisteme in gospodarstva večine tropskih držav [1].Po podatkih tajskega ministrstva za zdravje je bilo leta 2015 po vsej državi prijavljenih 142.925 primerov mrzlice denga in 141 smrtnih primerov, kar je več kot trikrat več primerov in smrti leta 2014 [4].Kljub zgodovinskim dokazom je mrzlica denga izkoreninjena ali močno zmanjšana zaradi komarjev Aedes.Po obvladovanju Aedes aegypti [5] se je stopnja okužb dramatično povečala in bolezen se je razširila po vsem svetu, deloma zaradi desetletij globalnega segrevanja.Odprava in nadzor Ae.Aedes aegypti je razmeroma težaven, ker je domači vektor komarjev, ki se čez dan pari, hrani, počiva in odlaga jajčeca v in okoli človeških bivališč.Poleg tega ima ta komar sposobnost prilagajanja okoljskim spremembam ali motnjam, ki jih povzročajo naravni dogodki (kot je suša) ali ukrepi človekovega nadzora, in se lahko vrne na prvotno število [6, 7].Ker so bila cepiva proti mrzlici denga odobrena šele pred kratkim in za mrzlico denga ni posebnega zdravljenja, je preprečevanje in zmanjšanje tveganja prenosa mrzlice denga v celoti odvisno od nadzora prenašalcev komarjev in odprave stika ljudi z vektorji.
Zlasti uporaba kemikalij za zatiranje komarjev ima zdaj pomembno vlogo v javnem zdravju kot pomemben sestavni del celovitega integriranega upravljanja vektorjev.Najbolj priljubljene kemične metode so uporaba nizkotoksičnih insekticidov, ki delujejo proti ličinkam komarjev (larvicidi) in odraslim komarjem (adidocidi).Pomemben je nadzor ličink z zmanjšanjem vira in redno uporabo kemičnih larvicidov, kot so organofosfati in regulatorji rasti žuželk.Vendar ostajajo negativni vplivi na okolje, povezani s sintetičnimi pesticidi ter njihovo delovno intenzivno in zapleteno vzdrževanje, še vedno velika skrb [8, 9].Tradicionalni aktivni nadzor vektorjev, kot je nadzor odraslih, ostaja najučinkovitejši način nadzora med virusnimi izbruhi, saj lahko hitro in v velikem obsegu izkorenini vektorje nalezljivih bolezni ter skrajša življenjsko dobo in dolgoživost lokalnih populacij vektorjev [3]., 10].Štirje razredi kemičnih insekticidov: organoklorovi (imenovani samo DDT), organofosfati, karbamati in piretroidi tvorijo osnovo programov za nadzor vektorjev, pri čemer piretroidi veljajo za najuspešnejši razred.So zelo učinkoviti proti različnim členonožcem in imajo nizko učinkovitost.strupenost za sesalce.Trenutno sintetični piretroidi predstavljajo večino komercialnih pesticidov in predstavljajo približno 25 % svetovnega trga pesticidov [11, 12].Permetrin in deltametrin sta piretroidna insekticida širokega spektra, ki se po vsem svetu že desetletja uporabljata za zatiranje različnih kmetijskih in medicinskih škodljivcev [13, 14].V petdesetih letih 20. stoletja je bil DDT izbran kot izbrana kemikalija za tajski nacionalni program za nadzor komarjev v javnem zdravstvu.Po široki uporabi DDT na območjih, endemičnih za malarijo, je Tajska med letoma 1995 in 2000 postopoma opustila uporabo DDT in ga nadomestila z dvema piretroidoma: permetrinom in deltametrinom [15, 16].Ti piretroidni insekticidi so bili uvedeni v zgodnjih devetdesetih letih prejšnjega stoletja za nadzor malarije in mrzlice denga, predvsem z obdelavo posteljnih mrež in uporabo termalnih meglic in razpršil z ultra nizko toksičnostjo [14, 17].Vendar pa so izgubili učinkovitost zaradi močne odpornosti proti komarjem in pomanjkanja skladnosti javnosti zaradi skrbi glede javnega zdravja in vpliva sintetičnih kemikalij na okolje.To predstavlja velik izziv za uspeh programov za nadzor vektorjev groženj [14, 18, 19].Za večjo učinkovitost strategije so potrebni pravočasni in ustrezni protiukrepi.Priporočeni postopki upravljanja vključujejo zamenjavo naravnih snovi, rotacijo kemikalij različnih razredov, dodajanje sinergistov in mešanje kemikalij ali hkratno uporabo kemikalij različnih razredov [14, 20, 21].Zato je nujno treba najti in razviti okolju prijazno, priročno in učinkovito alternativo in sinergist in ta študija je namenjena obravnavanju te potrebe.
Naravni insekticidi, zlasti tisti, ki temeljijo na rastlinskih sestavinah, so pokazali potencial pri vrednotenju trenutnih in prihodnjih alternativ za nadzor komarjev [22, 23, 24].Več študij je pokazalo, da je mogoče nadzorovati pomembne prenašalce komarjev z uporabo rastlinskih proizvodov, zlasti eteričnih olj (EO), kot uničevalcev odraslih.Adulticidne lastnosti proti nekaterim pomembnim vrstam komarjev so odkrili v številnih rastlinskih oljih, kot so zelena, kumina, cedoaria, janež, poper, timijan, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata in Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].Etilen oksid se zdaj ne uporablja le kot sam, temveč tudi v kombinaciji z ekstrahiranimi rastlinskimi snovmi ali obstoječimi sintetičnimi pesticidi, ki povzročajo različne stopnje toksičnosti.Kombinacije tradicionalnih insekticidov, kot so organofosfati, karbamati in piretroidi, z etilen oksidom/rastlinskim izvlečkom delujejo sinergistično ali antagonistično v svojih toksičnih učinkih in so se izkazale za učinkovite proti vektorjem bolezni in škodljivcem [31,32,33,34,35].Vendar je bila večina študij o sinergističnih toksičnih učinkih kombinacij fitokemikalij s sintetičnimi kemikalijami ali brez njih opravljena na vektorjih kmetijskih žuželk in škodljivcih, ne pa na medicinsko pomembnih komarjih.Poleg tega se je večina dela o sinergijskih učinkih rastlinsko-sintetičnih kombinacij insekticidov proti vektorjem komarjev osredotočila na larvicidni učinek.
V prejšnji študiji, ki so jo izvedli avtorji kot del tekočega raziskovalnega projekta, ki preverja sredstva za zastraševanje iz avtohtonih živilskih rastlin na Tajskem, je bilo ugotovljeno, da imajo etilen oksidi Cyperus rotundus, galangal in cimet potencialno aktivnost proti odraslim Aedes.Egipt [36].Zato je bila ta študija namenjena oceni učinkovitosti EO, izoliranih iz teh zdravilnih rastlin, proti komarjem vrste Aedes.aegypti, vključno s sevi, odpornimi proti piretroidom, in občutljivimi sevi.Analiziran je bil tudi sinergistični učinek binarnih mešanic etilen oksida in sintetičnih piretroidov z dobro učinkovitostjo pri odraslih za zmanjšanje uporabe tradicionalnih insekticidov in povečanje odpornosti proti vektorjem komarjev, zlasti proti Aedes.Aedes aegypti.Ta članek poroča o kemijski karakterizaciji učinkovitih eteričnih olj in njihovem potencialu za povečanje toksičnosti sintetičnega permetrina proti komarjem Aedes.aegypti pri sevih, občutljivih na piretroid (MCM-S) in odpornih sevih (PMD-R).
Korenike C. rotundus in A. galanga ter lubje C. verum (slika 1), uporabljeni za ekstrakcijo eteričnega olja, so bili kupljeni pri dobaviteljih zeliščnih zdravil v provinci Chiang Mai na Tajskem.Znanstvena identifikacija teh rastlin je bila dosežena s posvetovanjem z g. Jamesom Franklinom Maxwellom, herbarijskim botanikom, Oddelek za biologijo, Fakulteta za znanost, Univerza Chiang Mai (CMU), provinca Chiang Mai, Tajska, in znanstvenik Wannari Charoensap;na Oddelku za farmacijo Visoke šole za farmacijo Univerze Carnegie Mellon so vzorci vsake rastline shranjeni na Oddelku za parazitologijo na Medicinski fakulteti Univerze Carnegie Mellon za prihodnjo uporabo.
Vzorci rastlin so bili posamično sušeni v senci 3–5 dni na odprtem prostoru z aktivnim prezračevanjem in temperaturo okolja približno 30 ± 5 °C, da se odstrani vsebnost vlage pred ekstrakcijo naravnih eteričnih olj (EO).Skupno 250 g vsakega suhega rastlinskega materiala je bilo mehansko zmleto v grob prah in uporabljeno za izolacijo eteričnih olj (EO) s parno destilacijo.Destilacijski aparat je bil sestavljen iz električnega grelnega plašča, 3000 ml bučke z okroglim dnom, ekstrakcijske kolone, kondenzatorja in naprave Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokio, Japonska) .V bučko dodajte 1600 ml destilirane vode in 10–15 steklenih kroglic, nato pa z električnim grelnikom segrevajte na približno 100 °C vsaj 3 ure, dokler destilacija ni končana in ne nastaja več EO.Plast EO smo ločili od vodne faze z lijem ločnikom, posušili nad brezvodnim natrijevim sulfatom (Na2SO4) in shranili v zaprti rjavi steklenici pri 4 °C, dokler nismo pregledali kemične sestave in aktivnosti odraslih.
Kemična sestava eteričnih olj je bila izvedena sočasno z biološkim testom za adultno snov.Kvalitativno analizo smo izvedli s sistemom GC-MS, ki ga sestavljata plinski kromatograf Hewlett-Packard (Wilmington, CA, ZDA) 7890A, opremljen z enim kvadrupolnim masnim selektivnim detektorjem (Agilent Technologies, Wilmington, CA, ZDA) in MSD 5975C (EI ).(Agilent Technologies).
Kromatografska kolona – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × debelina filma 0,25 µm).Skupni čas delovanja GC-MS je bil 20 minut.Pogoji analize so, da sta temperaturi injektorja in prenosnega voda 250 oziroma 280 °C;temperatura peči je nastavljena tako, da se poveča od 50 °C do 250 °C s hitrostjo 10 °C/min, nosilni plin je helij;pretok 1,0 ml/min;volumen injekcije je 0,2 µL (1/10 % prostornine v CH2Cl2, razmerje delitve 100:1);Za GC-MS detekcijo se uporablja elektronski ionizacijski sistem z ionizacijsko energijo 70 eV.Obseg zajema je 50–550 atomskih masnih enot (amu), hitrost skeniranja pa 2,91 skeniranja na sekundo.Relativni odstotki komponent so izraženi kot odstotki, normalizirani glede na površino vrha.Identifikacija sestavin EO temelji na njihovem retencijskem indeksu (RI).RI je bil izračunan z uporabo enačbe Van den Doola in Kratza [37] za serijo n-alkanov (C8-C40) in primerjan z retencijskimi indeksi iz literature [38] in podatkovnih zbirk knjižnic (NIST 2008 in Wiley 8NO8).Identiteta prikazanih spojin, kot sta struktura in molekulska formula, je bila potrjena s primerjavo z razpoložljivimi avtentičnimi vzorci.
Analitski standardi za sintetični permetrin in piperonil butoksid (PBO, pozitivna kontrola v sinergijskih študijah) so bili kupljeni pri Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, ZDA).Kompleti za testiranje odraslih Svetovne zdravstvene organizacije (WHO) in diagnostični odmerki papirja, impregniranega s permetrinom (0,75 %), so bili komercialno kupljeni pri Centru za nadzor vektorjev SZO v Penangu v Maleziji.Vse druge uporabljene kemikalije in reagenti so bili analitske stopnje in so bili kupljeni pri lokalnih institucijah v provinci Chiang Mai na Tajskem.
Komarji, uporabljeni kot testni organizmi v biološkem testu za odrasle, so bili prosto parjeni laboratorijski komarji Aedes.aegypti, vključno z občutljivim sevom Muang Chiang Mai (MCM-S) in odpornim sevom Pang Mai Dang (PMD-R).Sev MCM-S je bil pridobljen iz lokalnih vzorcev, zbranih na območju Muang Chiang Mai, provinca Chiang Mai, Tajska, in je bil vzdrževan v entomološki sobi Oddelka za parazitologijo Medicinske fakultete CMU od leta 1995 [39].Sev PMD-R, za katerega je bilo ugotovljeno, da je odporen na permetrin, je bil izoliran iz poljskih komarjev, prvotno zbranih v Ban Pang Mai Dang, okrožje Mae Tang, provinca Chiang Mai, Tajska, in se hrani na istem inštitutu od leta 1997 [40]. ].Sevi PMD-R so bili gojeni pod selektivnim pritiskom, da bi ohranili ravni odpornosti z intermitentno izpostavljenostjo 0,75 % permetrinu z uporabo detekcijskega kompleta WHO z nekaterimi modifikacijami [41].Vsak sev Ae.Aedes aegypti je bil posamično koloniziran v laboratoriju brez patogenov pri 25 ± 2 °C in 80 ± 10 % relativni vlažnosti ter 14:10 h svetlobno/temno fotoperiodo.Približno 200 ličink je bilo shranjenih v plastičnih pladnjih (33 cm dolgih, 28 cm širokih in 9 cm visokih), napolnjenih z vodo iz pipe z gostoto 150–200 ličink na pladenj in hranjenih dvakrat na dan s steriliziranimi pasjimi piškoti.Odrasle črve smo hranili v vlažnih kletkah in jih nenehno hranili z 10% vodno raztopino saharoze in 10% raztopino multivitaminskega sirupa.Samice komarjev redno sesajo kri za odlaganje jajčec.Samice, stare dva do pet dni, ki niso bile hranjene s krvjo, se lahko neprekinjeno uporabljajo v eksperimentalnih bioloških testih za odrasle.
Na odraslih samicah komarjev vrste Aedes je bil izveden biološki test odziva na odmerek in smrtnost EO.aegypti, MCM-S in PMD-R z uporabo lokalne metode, prilagojene v skladu s standardnim protokolom SZO za testiranje občutljivosti [42].EO iz vsake rastline smo serijsko razredčili s primernim topilom (npr. etanolom ali acetonom), da smo dobili stopnjevano serijo 4-6 koncentracij.Po anesteziji z ogljikovim dioksidom (CO2) smo komarje posamično stehtali.Anestezirani komarji so bili nato negibni na suhem filtrirnem papirju na prilagojeni hladni plošči pod stereomikroskopom, da bi preprečili ponovno aktivacijo med postopkom.Za vsako zdravljenje je bilo 0,1 μl raztopine EO naneseno na zgornji pronotum samice z uporabo ročnega mikrorazpršilnika Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, ZDA).Z vsako koncentracijo je bilo zdravljenih 25 samic, pri čemer je bila smrtnost v razponu od 10 % do 95 % za vsaj 4 različne koncentracije.Za kontrolo so služili komarji, obdelani s topilom.Da preprečite kontaminacijo preskusnih vzorcev, zamenjajte filtrirni papir z novim filtrirnim papirjem za vsak testirani EO.Odmerki, uporabljeni v teh bioloških testih, so izraženi v mikrogramih EO na miligram telesne teže žive ženske.Aktivnost PBO pri odraslih je bila prav tako ocenjena na podoben način kot EO, pri čemer je bil PBO uporabljen kot pozitivna kontrola v sinergističnih poskusih.Obdelane komarje v vseh skupinah so dali v plastične kozarce in jim dali 10 % saharoze in 10 % multivitaminskega sirupa.Vsi biološki testi so bili izvedeni pri 25 ± 2 °C in 80 ± 10 % relativni vlažnosti ter ponovljeni štirikrat s kontrolami.Smrtnost v 24-urnem obdobju vzreje je bila preverjena in potrjena s pomanjkanjem odziva komarjev na mehansko stimulacijo in nato zabeležena na podlagi povprečja štirih ponovitev.Eksperimentalne obdelave smo ponovili štirikrat za vsak testni vzorec z uporabo različnih serij komarjev.Rezultate smo povzeli in uporabili za izračun odstotne stopnje umrljivosti, ki je bila uporabljena za določitev 24-urnega smrtnega odmerka s probit analizo.
Sinergistični anticidni učinek EO in permetrina je bil ocenjen s postopkom analize lokalne toksičnosti [42], kot je opisano prej.Kot topilo uporabite aceton ali etanol, da pripravite permetrin v želeni koncentraciji, pa tudi binarno mešanico EO in permetrina (EO-permetrin: permetrin, pomešan z EO pri koncentraciji LD25).Testni kompleti (permetrin in EO-permetrin) so bili ocenjeni proti sevom MCM-S in PMD-R Ae.Aedes aegypti.Vsaki od 25 samic komarjev so dali štiri odmerke permetrina, da bi preizkusili njegovo učinkovitost pri ubijanju odraslih osebkov, pri čemer so vsako zdravljenje ponovili štirikrat.Za identifikacijo kandidatov za sinergiste EO je bilo vsaki od 25 samic komarjev danih 4 do 6 odmerkov EO-permetrina, pri čemer je bila vsaka aplikacija ponovljena štirikrat.Zdravljenje s PBO-permetrinom (permetrin, pomešan s koncentracijo PBO LD25) je služilo tudi kot pozitivna kontrola.Odmerki, uporabljeni v teh bioloških testih, so izraženi v nanogramih testnega vzorca na miligram telesne teže žive samice.Štiri eksperimentalne ocene za vsak sev komarjev so bile izvedene na posamezno vzrejenih serijah, podatki o smrtnosti pa so bili združeni in analizirani z uporabo Probita za določitev 24-urnega smrtnega odmerka.
Stopnja umrljivosti je bila prilagojena z uporabo Abbottove formule [43].Prilagojene podatke smo analizirali z regresijsko analizo Probit z računalniškim statističnim programom SPSS (verzija 19.0).Letalne vrednosti 25 %, 50 %, 90 %, 95 % in 99 % (LD25, LD50, LD90, LD95 oziroma LD99) so bile izračunane z uporabo ustreznih 95 % intervalov zaupanja (95 % IZ).Meritve pomembnosti in razlik med testnimi vzorci so bile ocenjene z uporabo hi-kvadrat testa ali Mann-Whitneyjevega U testa znotraj vsakega biološkega testa.Rezultati so veljali za statistično pomembne pri P< 0,05.Koeficient upora (RR) je ocenjen na ravni LD50 z uporabo naslednje formule [12]:
RR > 1 označuje odpornost, RR ≤ 1 pa občutljivost.Vrednost sinergijskega razmerja (SR) vsakega kandidata za sinergista se izračuna na naslednji način [34, 35, 44]:
Ta faktor razdeli rezultate v tri kategorije: za vrednost SR 1±0,05 velja, da nima očitnega učinka, za vrednost SR >1,05 velja, da ima sinergistični učinek, vrednost SR A svetlo rumeno tekoče olje pa je lahko pridobljen s parno destilacijo korenik C. rotundus in A. galanga ter lubja C. verum.Dobitki, izračunani na suho maso, so bili 0,15 %, 0,27 % (m/m) in 0,54 % (v/v).w) oziroma (tabela 1).GC-MS študija kemijske sestave olj C. rotundus, A. galanga in C. verum je pokazala prisotnost 19, 17 in 21 spojin, ki so predstavljale 80,22, 86,75 oziroma 97,24 % vseh komponent (Tabela 2 ).Oljne spojine korenike C. lucidum so večinoma sestavljene iz ciperonena (14,04 %), sledijo mu karalen (9,57 %), α-kapselan (7,97 %) in α-kapselan (7,53 %).Glavna kemična sestavina koreničnega olja galangala je β-bisabolen (18,27 %), sledijo mu α-bergamoten (16,28 %), 1,8-cineol (10,17 %) in piperonol (10,09 %).Medtem ko je bil cinamaldehid (64,66 %) opredeljen kot glavna sestavina olja lubja C. verum, so cimetov acetat (6,61 %), α-kopaen (5,83 %) in 3-fenilpropionaldehid (4,09 %) veljali za manj pomembne sestavine.Kemične strukture ciperna, β-bisabolena in cinamaldehida so glavne spojine C. rotundus, A. galanga oziroma C. verum, kot je prikazano na sliki 2.
Rezultati treh OO so ocenili aktivnost odraslih proti komarjem Aedes.aegypti so prikazani v tabeli 3. Ugotovljeno je bilo, da imajo vsi EO smrtonosne učinke na komarje MCM-S Aedes pri različnih vrstah in odmerkih.Aedes aegypti.Najučinkovitejši EO je C. verum, sledita A. galanga in C. rotundus z vrednostmi LD50 3,30, 7,97 in 10,05 μg/mg MCM-S samice, nekoliko višje od 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) in 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R pri ženskah.To ustreza PBO, ki ima nekoliko večji učinek pri odraslih na PMD-R kot sev MSM-S, z vrednostmi LD50 4,79 oziroma 6,30 μg/mg samic (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057) .).Izračunamo lahko, da so vrednosti LD50 C. verum, A. galanga, C. rotundus in PBO proti PMD-R približno 0,98, 0,99, 0,95 oziroma 0,76-krat nižje od tistih proti MCM-S.To torej kaže, da je dovzetnost za PBO in EO razmeroma podobna med obema sevoma Aedes.Čeprav je bil PMD-R bolj dovzeten kot MCM-S, občutljivost Aedes aegypti ni bila pomembna.Nasprotno pa sta se oba seva Aedes močno razlikovala v svoji občutljivosti na permetrin.aegypti (tabela 4).PMD-R je pokazal znatno odpornost na permetrin (vrednost LD50 = 0,44 ng/mg pri ženskah) z višjo vrednostjo LD50 3,70 v primerjavi z MCM-S (vrednost LD50 = 0,44 ng/mg pri ženskah) ng/mg pri ženskah (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Čeprav je PMD-R veliko manj občutljiv na permetrin kot MCM-S, je njegova občutljivost na PBO in olja C. verum, A. galanga in C. rotundus nekoliko večja kot MCM-S.
Kot je bilo ugotovljeno v biološkem preizkusu kombinacije EO-permetrin pri odrasli populaciji, so binarne mešanice permetrina in EO (LD25) pokazale bodisi sinergijo (vrednost SR > 1,05) bodisi brez učinka (vrednost SR = 1 ± 0,05).Kompleksni učinki mešanice EO-permetrina na odrasle na eksperimentalne albino komarje.Seva Aedes aegypti MCM-S in PMD-R sta prikazana v tabeli 4 in sliki 3. Ugotovljeno je bilo, da je dodatek olja C. verum nekoliko zmanjšal LD50 permetrina proti MCM-S in rahlo povečal LD50 proti PMD-R na 0,44– 0,42 ng/mg pri ženskah in od 3,70 do 3,85 ng/mg pri ženskah.Nasprotno pa je dodatek olj C. rotundus in A. galanga znatno zmanjšal LD50 permetrina na MCM-S z 0,44 na 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) in na 0,11 (U = 0)., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg žensk.Na podlagi vrednosti LD50 za MCM-S so bile vrednosti SR mešanice EO-permetrin po dodatku olja C. rotundus in A. galanga 6,28 oziroma 4,00.V skladu s tem se je LD50 permetrina proti PMD-R znatno zmanjšal s 3,70 na 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) in na 0,003 z dodatkom olj C. rotundus in A. galanga (U = 0 ) ., Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg ženske.Vrednost SR permetrina v kombinaciji s C. rotundus proti PMD-R je bila 8,81, medtem ko je bila vrednost SR mešanice galangal-permetrin 1233,33.V primerjavi z MCM-S se je vrednost LD50 pozitivne kontrole PBO zmanjšala z 0,44 na 0,26 ng/mg (samice) in s 3,70 ng/mg (samice) na 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) in PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Vrednosti SR mešanice PBO-permetrin za seve MCM-S in PMD-R so bile 1,69 oziroma 5,69.Ti rezultati kažejo, da olja C. rotundus in A. galanga ter PBO povečajo toksičnost permetrina v večji meri kot olje C. verum za seva MCM-S in PMD-R.
Adultna aktivnost (LD50) EO, PBO, permetrina (PE) in njihovih kombinacij proti na piretroid občutljive (MCM-S) in odporne (PMD-R) seve komarjev Aedes.Aedes aegypti
[45].Sintetični piretroidi se uporabljajo po vsem svetu za zatiranje skoraj vseh členonožcev kmetijskega in medicinskega pomena.Vendar pa je zaradi škodljivih posledic uporabe sintetičnih insekticidov, predvsem v smislu razvoja in razširjenosti odpornosti komarjev ter dolgoročnega vpliva na zdravje in okolje, nujno treba zmanjšati uporabo tradicionalnih sintetičnih insekticidov in razviti alternative [35, 46, 47].Poleg varovanja okolja in zdravja ljudi so prednosti botaničnih insekticidov visoka selektivnost, globalna dostopnost ter enostavna proizvodnja in uporaba, zaradi česar so privlačnejši za zatiranje komarjev [32, 48, 49].Ta študija je poleg razjasnitve kemičnih značilnosti učinkovitih eteričnih olj z analizo GC-MS ocenila tudi moč eteričnih olj za odrasle in njihovo sposobnost povečanja toksičnosti sintetičnega permetrina.aegypti pri sevih, občutljivih na piretroid (MCM-S) in odpornih sevih (PMD-R).
Karakterizacija GC-MS je pokazala, da so glavne sestavine olj C. rotundus, A. galanga in C. verum ciper (14,04 %), β-bisabolen (18,27 %) in cinamaldehid (64,66 %).Te kemikalije so pokazale različne biološke aktivnosti.Ahn et al.[50] so poročali, da 6-acetoksiciperen, izoliran iz korenike C. rotundus, deluje kot protitumorska spojina in lahko inducira od kaspaze odvisno apoptozo v rakavih celicah jajčnikov.β-Bisabolen, ekstrahiran iz eteričnega olja drevesa mire, kaže specifično citotoksičnost proti človeškim in mišjim tumorskim celicam dojke tako in vitro kot in vivo [51].Poročali so, da ima cinamaldehid, pridobljen iz naravnih izvlečkov ali sintetiziran v laboratoriju, insekticidno, protibakterijsko, protiglivično, protivnetno, imunomodulatorno, protirakavo in antiangiogeno delovanje [52].
Rezultati od odmerka odvisnega biološkega testa aktivnosti odraslih so pokazali dober potencial testiranih EO in pokazali, da sta imela seva komarjev Aedes MCM-S in PMD-R podobno občutljivost za EO in PBO.Aedes aegypti.Primerjava učinkovitosti EO in permetrina je pokazala, da ima slednji močnejši alercidni učinek: vrednosti LD50 znašajo 0,44 oziroma 3,70 ng/mg pri samicah za seve MCM-S in PMD-R.Te ugotovitve podpirajo številne študije, ki kažejo, da so naravno prisotni pesticidi, zlasti proizvodi rastlinskega izvora, na splošno manj učinkoviti kot sintetične snovi [31, 34, 35, 53, 54].To je morda zato, ker je prvo kompleksna kombinacija aktivnih ali neaktivnih sestavin, medtem ko je drugo prečiščena ena aktivna spojina.Vendar pa lahko raznolikost in kompleksnost naravnih učinkovin z različnimi mehanizmi delovanja povečata biološko aktivnost ali ovirata razvoj odpornosti v populacijah gostiteljev [55, 56, 57].Številni raziskovalci so poročali o potencialu proti komarjem C. verum, A. galanga in C. rotundus ter njihovih sestavin, kot so β-bisabolen, cinamaldehid in 1,8-cineol [22, 36, 58, 59, 60, 61, 62,63,64].Vendar pa je pregled literature pokazal, da ni bilo predhodnih poročil o njegovem sinergističnem učinku s permetrinom ali drugimi sintetičnimi insekticidi proti komarjem vrste Aedes.Aedes aegypti.
V tej študiji so opazili pomembne razlike v občutljivosti za permetrin med obema sevoma Aedes.Aedes aegypti.MCM-S je občutljiv na permetrin, medtem ko je PMD-R veliko manj občutljiv nanj, s stopnjo odpornosti 8,41.V primerjavi z občutljivostjo MCM-S je PMD-R manj občutljiv na permetrin, vendar bolj občutljiv na EO, kar je podlaga za nadaljnje študije, katerih cilj je povečati učinkovitost permetrina s kombinacijo z EO.Sinergistični biološki test učinkov na odrasle, ki temelji na kombinaciji, je pokazal, da so binarne mešanice EO in permetrina zmanjšale ali povečale umrljivost odraslih Aedes.Aedes aegypti.Dodatek olja C. verum je nekoliko zmanjšal LD50 permetrina proti MCM-S, vendar rahlo povečal LD50 proti PMD-R z vrednostmi SR 1,05 oziroma 0,96.To kaže, da olje C. verum nima sinergističnega ali antagonističnega učinka na permetrin, ko je bilo testirano na MCM-S in PMD-R.V nasprotju s tem sta olja C. rotundus in A. galanga pokazala pomemben sinergistični učinek s pomembnim zmanjšanjem vrednosti LD50 permetrina na MCM-S ali PMD-R.Ko je bil permetrin kombiniran z EO C. rotundus in A. galanga, so bile vrednosti SR mešanice EO-permetrin za MCM-S 6,28 oziroma 4,00.Poleg tega, ko je bil permetrin ovrednoten glede na PMD-R v kombinaciji s C. rotundus (SR = 8,81) ali A. galanga (SR = 1233,33), so se vrednosti SR znatno povečale.Treba je omeniti, da sta C. rotundus in A. galanga povečala toksičnost permetrina proti PMD-R Ae.aegypti bistveno.Podobno je bilo ugotovljeno, da PBO poveča toksičnost permetrina z vrednostmi SR 1,69 oziroma 5,69 za seve MCM-S oziroma PMD-R.Ker sta imela C. rotundus in A. galanga najvišje vrednosti SR, sta veljala za najboljša sinergista pri povečanju toksičnosti permetrina na MCM-S oziroma PMD-R.
Več prejšnjih študij je poročalo o sinergističnem učinku kombinacij sintetičnih insekticidov in rastlinskih izvlečkov proti različnim vrstam komarjev.Larvicidni biološki test proti Anopheles Stephensi, ki sta ga proučevala Kalayanasundaram in Das [65], je pokazal, da je fention, organofosfat širokega spektra, povezan s Cleodendron inerme, Pedalium murax in Parthenium hysterophorus.Med izvlečki so opazili pomembno sinergijo s sinergističnim učinkom (SF) 1,31., 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 oziroma 2,23.Pri larvicidnem pregledu 15 vrst mangrov je bilo ugotovljeno, da je petrolej etrski izvleček korenin mangrovke najbolj učinkovit proti Culex quinquefasciatus z vrednostjo LC50 25,7 mg/l [66].Poročali so tudi, da sinergistični učinek tega izvlečka in botaničnega insekticida piretruma zmanjša LC50 piretruma proti ličinkam C. quinquefasciatus z 0,132 mg/L na 0,107 mg/L, poleg tega je bil v tej študiji uporabljen SF izračun 1,23.34,35,44].Ocenjena je bila kombinirana učinkovitost ekstrakta korenine Solanum citron in več sintetičnih insekticidov (npr. fentiona, cipermetrina (sintetični piretroid) in timethos (organofosforni larvicid)) proti komarjem Anopheles.Stephensi [54] in C. quinquefasciatus [34].Kombinirana uporaba cipermetrina in petroleternega ekstrakta rumenega sadja je pokazala sinergistični učinek na cipermetrin v vseh razmerjih.Najučinkovitejše razmerje je bila binarna kombinacija 1:1 z vrednostmi LC50 in SF 0,0054 ppm oziroma 6,83 glede na An.Stephen West [54].Medtem ko je bila binarna mešanica S. xanthocarpum in temefosa 1:1 antagonistična (SF = 0,6406), je kombinacija S. xanthocarpum-fention (1:1) pokazala sinergistično aktivnost proti C. quinquefasciatus s SF 1,3125 [34]].Tong in Blomquist [35] sta proučevala učinke rastlinskega etilen oksida na toksičnost karbarila (karbamata širokega spektra) in permetrina za komarje Aedes.Aedes aegypti.Rezultati so pokazali, da je etilen oksid iz agarja, črnega popra, brina, helikrizuma, sandalovine in sezama povečal toksičnost karbarila za komarje Aedes.aegypti ličinke SR vrednosti se gibljejo od 1,0 do 7,0.Nasprotno pa nobeden od EO ni bil toksičen za odrasle komarje Aedes.Na tej stopnji za kombinacijo Aedes aegypti in EO-karbarila niso poročali o sinergijskih učinkih.PBO je bil uporabljen kot pozitivna kontrola za povečanje toksičnosti karbarila proti komarjem Aedes.Vrednosti SR ličink Aedes aegypti in odraslih osebkov so 4,9-9,5 oziroma 2,3.Samo binarne mešanice permetrina in EO ali PBO so testirali na larvicidno delovanje.Mešanica EO-permetrin je delovala antagonistično, mešanica PBO-permetrin pa sinergistično proti komarjem Aedes.Ličinke Aedes aegypti.Vendar poskusi odziva na odmerek in ocena SR za mešanice PBO-permetrin še niso bili izvedeni.Čeprav je bilo doseženih malo rezultatov glede sinergijskih učinkov fitosintetičnih kombinacij proti vektorjem komarjev, ti podatki podpirajo obstoječe rezultate, ki odpirajo možnost dodajanja sinergistov ne le za zmanjšanje uporabljenega odmerka, ampak tudi za povečanje učinka ubijanja.Učinkovitost žuželk.Poleg tega so rezultati te študije prvič pokazali, da imata olji C. rotundus in A. galanga sinergistično znatno višjo učinkovitost proti sevom komarjev Aedes, ki so občutljivi na piretroide in odporni na piretroide, v primerjavi s PBO v kombinaciji s toksičnostjo permetrina.Aedes aegypti.Vendar pa so nepričakovani rezultati sinergistične analize pokazali, da ima olje C. verum največjo aktivnost proti odraslim osebam proti obema sevoma Aedes.Presenetljivo je bil toksični učinek permetrina na Aedes aegypti nezadovoljiv.Razlike v toksičnih učinkih in sinergijskih učinkih so lahko deloma posledica izpostavljenosti različnim vrstam in stopnjam bioaktivnih sestavin v teh oljih.
Kljub prizadevanjem, da bi razumeli, kako izboljšati učinkovitost, ostajajo sinergistični mehanizmi nejasni.Možni razlogi za različno učinkovitost in sinergistični potencial lahko vključujejo razlike v kemični sestavi testiranih izdelkov in razlike v dovzetnosti za komarje, povezane s stanjem in razvojem odpornosti.Obstajajo razlike med glavnimi in stranskimi komponentami etilenoksida, testiranimi v tej študiji, in nekatere od teh spojin so pokazale, da imajo repelentne in toksične učinke proti različnim škodljivcem in vektorjem bolezni [61,62,64,67,68].Vendar glavne spojine, značilne za olja C. rotundus, A. galanga in C. verum, kot so ciper, β-bisabolen in cinamaldehid, v tem dokumentu niso bile preizkušene glede njihovega delovanja proti odraslim in sinergističnih učinkov proti Ae.Aedes aegypti.Zato so potrebne prihodnje študije, da bi izolirali aktivne sestavine, prisotne v vsakem eteričnem olju, in pojasnili njihovo insekticidno učinkovitost in sinergistične interakcije proti temu prenašalcu komarjev.Na splošno je insekticidno delovanje odvisno od delovanja in reakcije med strupi in tkivi žuželk, ki jih lahko poenostavimo in razdelimo na tri stopnje: prodiranje v kožo telesa žuželk in membrane ciljnih organov, aktivacija (= interakcija s tarčo) in razstrupljanje.strupene snovi [57, 69].Zato sinergizem insekticidov, ki ima za posledico povečano učinkovitost kombinacij toksičnih snovi, zahteva vsaj eno od teh kategorij, kot je povečana penetracija, večja aktivacija akumuliranih spojin ali manj zmanjšana detoksikacija aktivne sestavine pesticida.Energijska toleranca na primer upočasni prodiranje obnohtne kožice skozi odebeljeno obnohtno kožico in biokemično odpornost, kot je izboljšan metabolizem insekticidov, opažen pri nekaterih odpornih sevih žuželk [70, 71].Pomembna učinkovitost EO pri povečanju toksičnosti permetrina, zlasti proti PMD-R, lahko kaže na rešitev problema odpornosti proti insekticidom z interakcijo z mehanizmi odpornosti [57, 69, 70, 71].Tong in Blomquist [35] sta podprla rezultate te študije s prikazom sinergijske interakcije med EO in sintetičnimi pesticidi.aegypti, obstajajo dokazi o inhibitornem delovanju proti razstrupljevalnim encimom, vključno z monooksigenazami in karboksilesterazami citokroma P450, ki so tesno povezani z razvojem odpornosti na tradicionalne pesticide.PBO naj ne bi bil samo presnovni zaviralec monooksigenaze citokroma P450, ampak tudi izboljša penetracijo insekticidov, kar dokazuje njegova uporaba kot pozitivne kontrole v sinergističnih študijah [35, 72].Zanimivo je, da je 1,8-cineol, ena od pomembnih sestavin v galganovem olju, znan po svojih toksičnih učinkih na vrste žuželk [22, 63, 73] in naj bi imel sinergistične učinke na več področjih raziskav biološke aktivnosti [ 74]..,75,76,77].Poleg tega ima 1,8-cineol v kombinaciji z različnimi zdravili, vključno s kurkuminom [78], 5-fluorouracilom [79], mefenaminsko kislino [80] in zidovudinom [81], tudi učinek pospeševanja prepustnosti.in vitro.Tako možna vloga 1,8-cineola pri sinergističnem insekticidnem delovanju ni samo kot učinkovina, ampak tudi kot ojačevalec penetracije.Zaradi večjega sinergizma s permetrinom, zlasti proti PMD-R, so lahko sinergistični učinki olja galangala in olja trihozanta, opaženi v tej študiji, posledica interakcij z mehanizmi odpornosti, tj. povečane prepustnosti za klor.Piretroidi povečajo aktivacijo akumuliranih spojin in zavirajo razstrupljevalne encime, kot so citokrom P450 monooksigenaze in karboksilesteraze.Vendar ti vidiki zahtevajo nadaljnje študije, da bi pojasnili specifično vlogo EO in njegovih izoliranih spojin (samih ali v kombinaciji) v sinergističnih mehanizmih.
Leta 1977 so poročali o naraščajočih stopnjah odpornosti na permetrin pri večjih vektorskih populacijah na Tajskem, v naslednjih desetletjih pa so uporabo permetrina v veliki meri nadomestile druge piretroidne kemikalije, zlasti tiste, ki jih je nadomestil deltametrin [82].Vendar pa je vektorska odpornost na deltametrin in druge razrede insekticidov izjemno pogosta po vsej državi zaradi pretirane in vztrajne uporabe [14, 17, 83, 84, 85, 86].Za boj proti tej težavi je priporočljivo zamenjati ali ponovno uporabiti zavržene pesticide, ki so bili prej učinkoviti in manj strupeni za sesalce, kot je permetrin.Čeprav je bila uporaba permetrina v nedavnih nacionalnih vladnih programih za nadzor komarjev zmanjšana, je v populaciji komarjev še vedno mogoče najti odpornost na permetrin.To je lahko posledica izpostavljenosti komarjev komercialnim gospodinjskim proizvodom za zatiranje škodljivcev, ki so večinoma sestavljeni iz permetrina in drugih piretroidov [14, 17].Tako uspešna ponovna uporaba permetrina zahteva razvoj in izvajanje strategij za zmanjšanje odpornosti vektorjev.Čeprav nobeno od posamezno testiranih eteričnih olj v tej študiji ni bilo tako učinkovito kot permetrin, je sodelovanje s permetrinom povzročilo impresivne sinergijske učinke.To je obetaven pokazatelj, da interakcija EO z mehanizmi odpornosti povzroči, da je kombinacija permetrina z EO učinkovitejša od insekticida ali samega EO, zlasti proti PMD-R Ae.Aedes aegypti.Prednosti sinergističnih zmesi pri povečanju učinkovitosti, kljub uporabi nižjih odmerkov za nadzor prenašalcev, lahko privedejo do izboljšanega obvladovanja odpornosti in zmanjšanja stroškov [33, 87].Iz teh rezultatov je razveseljivo ugotoviti, da so bili EO A. galanga in C. rotundus bistveno bolj učinkoviti kot PBO pri sinergiziranju toksičnosti permetrina v sevih MCM-S in PMD-R in so potencialna alternativa tradicionalnim ergogenim pripomočkom.
Izbrani EO so imeli pomembne sinergijske učinke pri povečanju toksičnosti za odrasle proti PMD-R Ae.aegypti, še posebej galangovo olje, ima vrednost SR do 1233,33, kar kaže, da EO obeta veliko kot sinergist pri povečanju učinkovitosti permetrina.To lahko spodbudi uporabo novega aktivnega naravnega izdelka, kar bi skupaj lahko povečalo uporabo zelo učinkovitih izdelkov za zatiranje komarjev.Prav tako razkriva potencial etilen oksida kot alternativnega sinergista za učinkovito izboljšanje starejših ali tradicionalnih insekticidov za reševanje obstoječih težav z odpornostjo populacij komarjev.Uporaba takoj dostopnih rastlin v programih za nadzor komarjev ne le zmanjša odvisnost od uvoženih in dragih materialov, ampak tudi spodbuja lokalna prizadevanja za krepitev sistemov javnega zdravja.
Ti rezultati jasno kažejo pomemben sinergistični učinek, ki ga ustvari kombinacija etilen oksida in permetrina.Rezultati poudarjajo potencial etilen oksida kot rastlinskega sinergista pri nadzoru komarjev, kar povečuje učinkovitost permetrina proti komarjem, zlasti pri odpornih populacijah.Prihodnji razvoj in raziskave bodo zahtevale sinergistično bioanalizo olj galangala in alpinije ter njunih izoliranih spojin, kombinacije insekticidov naravnega ali sintetičnega izvora proti več vrstam in stadijem komarjev ter testiranje toksičnosti proti neciljnim organizmom.Praktična uporaba etilen oksida kot uspešnega alternativnega sinergista.
Svetovna zdravstvena organizacija.Globalna strategija za preprečevanje in obvladovanje denga 2012–2020.Ženeva: Svetovna zdravstvena organizacija, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al.Zika virus: zgodovina, pojav, biologija in možnosti nadzora.Protivirusne raziskave.2016; 130: 69–80.
Svetovna zdravstvena organizacija.Informativni list o dengi.2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Datum dostopa: 20. januar 2017
Ministrstvo za javno zdravje.Trenutno stanje primerov mrzlice denga in hemoragične mrzlice denga na Tajskem.2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Datum dostopa: 6. januar 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 let preprečevanja mrzlice mrzlice in nadzora prenašalcev v Singapurju.Nenadna nalezljiva bolezen.2006; 12: 887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identificirajte izzive in predlagajte rešitve za nadzor virusnih vektorjev Aedes aegypti.PLOS Medicina.2008; 5: 362–6.
Centri za nadzor in preprečevanje bolezni.Mrzlica denga, entomologija in ekologija.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Datum dostopa: 6. januar 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Primerjava larvicidne aktivnosti listov, lubja, stebel in korenin Jatropa curcas (Euphorbiaceae) proti vektorju malarije Anopheles gambiae.SZhBR.2014; 3: 29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Značilnosti habitatov ličink Anopheles na območjih malarije programa izkoreninjenja malarije v jugovzhodnem Iranu.Asia Pacific J Trop Biomed.2014; 4 (dodatek 1): S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Pregled pristopov k nadzoru vektorjev, preprečevanju in nadzoru izbruhov virusa Zahodnega Nila ter izzivov, s katerimi se sooča Evropa.Vektor parazitov.2014; 7: 323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Izbor in molekularni mehanizmi odpornosti na cipermetrin pri rdečih gosenicah (Amsacta albistriga Walker).Biokemijska fiziologija škodljivcev.2014; 117: 54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratorijska študija odpornosti na permetrin in navzkrižne odpornosti Culex quinquefasciatus na druge insekticide.Raziskovalni center Palastor.2015; 114: 2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Kemija pesticidov: blaginja ljudi in okolje, let.3: Mehanizem delovanja, metabolizem in toksikologija.New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Pregled odpornosti proti insekticidom in vedenjsko izogibanje vektorjem človeških bolezni na Tajskem.Vektor parazitov.2013; 6: 280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Trenutni vzorci odpornosti proti insekticidom med vektorji komarjev na Tajskem.Jugovzhodna Azija J Trop Med Public Health.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Stanje malarije na Tajskem.Jugovzhodna Azija J Trop Med Public Health.2000; 31: 225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Časovna frekvenca mutacij F1534C in V1016G knockdown odpornosti pri komarjih Aedes aegypti v Chiang Maiju na Tajskem in vpliv mutacij na učinkovitost razpršil s toplotno meglo ki vsebujejo piretroide.Aktatrop.2016; 162: 125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Odpornost na insekticide v glavnih prenašalcih mrzlice mrzlice Aedes albopictus in Aedes aegypti.Biokemijska fiziologija škodljivcev.2012; 104: 126–31.
Čas objave: 8. julij 2024